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Laboratorio de Genética General: Extracción del ADN, Electroforesis de Proteínas y ADN

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PREGUNTA DE LA GUÍA DE LABORATORIO

  1. EXTRACCIÓN DE ADN

–         ¿Qué función tiene el NaCl?

–         ¿Qué función tiene el detergente?

–         ¿Por qué el ADN precipita con el alcohol absoluto?

 

  1. IDENTIFICACIÓN DE LAS FIBRAS DE ADN

–         ¿Por qué el azul de metileno tiñe las fibras del ADN?

–         ¿De que color se observan las fibras del ADN?

 

  1. INVETIGUE

–         Explique el efecto del detergente sobre la membrana celular.

–         ¿Qué otro tipo de células pueden ser utilizada sen esta experiencia?

–         ¿Nombre tres propiedades del ADN que son demostrada sen esta experiencia?

–         ¿Qué otros  colorantes que pueden ser utilizados para teñir las fibras de ADN?

 

  1. PREGUNTAS DE LA GUÍA DE LABORATORIO

–         ¿Qué función tiene los siguientes reactivos en la extracción del DNA en células eucariotas?

  • Detergente
  • Ablandador
  • Alcohol etílico

 

–         ¿Explique como se puede determinar la concentración del ADN?

–         ¿Qué información se puede obtener al hacer la electroforesis de ADN, Explique?

 

 

RESULTADOS

  1. EXTRACCIÓN DEL ADN

–         El NaCl tiene como función de proteger y guardar el ADN.

–         El detergente es utilizado para realizar una mezcla homogénea de los tejidos utilizados.

 

  1. IDENTIFICACIÓN DE LAS FIBRAS DE ADN

–         El azul de metileno tiñe el ADN, por que este posee un grupo fosfato en su estructura.

–         Las fibras del ADN se tiñeron de color azul tirando a morado.

 

  1. INVESTIGUE

 

–         El detergente rompe los enlaces de la membrana celular para que quede como una mezcla homogénea.

–         En Esta experiencia pueden ser utilizadas células vegetales como la cebolla.

–         Propiedades del ADN:

v  El ADN posee un grupo fosfato por esto se tiñe con colorantes básicos

v  Insoluble en alcohol etílico frío

v  La enzima nucleasas que se encuentra en el cuerpo humano rompe con facilidad los enlaces de ADN, por que razón se utilizaron guantes en el experimento.

–         Otros colorantes básicos como el difenilamida y el Bromuro de Etidio.

 

  1. PREGUNTAS DE LA GUÍA DE LABORATORIO

 

–         Función de reactivos:

–         Detergente: romper enlaces para realizar una mezcla homogénea de tejidos con ADN.

–         Ablandador: hacer los rompimiento más frágiles y se puedan realizar en menos tiempo.

–         Alcohol Etílico: separa el ADN de la solución, haciéndolo precipitar.

 

–         La concentración del ADN puede determinarse es por medio de la visualización de un gel de electroforesis en el cual se colocan muestras con concentraciones conocidas.

 

–         La electroforesis en gel es utilizada en la detección, en el control de pureza, en caracterización, cuantificación (por comparación con controles) así como preparación y purificación (por extracción de bandas desde el gel) de moléculas y fragmentos de DNA.

 

 

 

 

RESULTADOS GRÁFICOS DEL LABORATORIO

 

ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS

 

Las tres muestras se notaron las albuminas más lejos como se explico en clase, ya que estas poseen mas carga que las demás y siguiéndole se encontraron las globulinas alfa, las betas y luego las gama. En algunas de las muestras no se noto muy claramente.

 

 

EXTRACCIÓN DE ADN

 

Se notaron claramente luego de ser aplicado el alcohol etílico frío en la solución los restos de fibras de ADN por encima del precipitado, el tubo de ensayo no se podia agitar para no dañar las muestras ya que podian mezclarse y ser inservibles para el experimento. Luego estas muestras fueron teñidas y vistas en el microscopio y se observaron las fibras de color azul, dando la conclusión que si era ADN.

 

 

EXTRACCIÓN DE ADN

 

El gel fue introducido en el transiluminador, este aparato fue encendido y se observaron las rayitas de color naranja en el gel de agarosa. Determinando el avance de las muestras de ADN.

 

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___________.WEBSCOLAR. Laboratorio de Genética General: Extracción del ADN, Electroforesis de Proteínas y ADN. http://www.webscolar.com/laboratorio-de-genetica-general-extraccion-del-adn-electroforesis-de-proteinas-y-adn. Fecha de consulta: 8 de noviembre de 2014.

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